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湖北熒光原位雜交-貝科新肽科技公司

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FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質(zhì)標記(間接或直接)而得名,熒光原位雜交,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實驗室逐步進入臨床診斷領域?;驹硎菬晒鈽擞浀暮怂崽结樤谧冃院笈c已變性的靶核酸在退火 溫度下復性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進行分析。DNA熒光標記探針是其中常用的一類核酸探針。利用此探針可對組織、細胞或染色體中的DNA進行染色體及基因水平 的分析。熒光標記探針不對環(huán)境構(gòu)成污染,靈敏度能得到保障,可進行多色觀察分析,因而可同時使用多個探針,縮 短因單個探針分開使用導致的周期過程和技術(shù)障礙。

而是對完整的斑馬魚胚胎進行探針雜交及檢測,從整體上把握探針的結(jié)合部位,然后對胚胎進行切片,以確定探針結(jié)合的具體位置。整胚原位雜交在斑馬魚分子生物學研究中是一種非常重要的實驗方法,原位雜交的探針可以是同位素的探針,用自顯影來檢測;也可以是非同位素的探針,通過熒光或酶法予以檢測。我們這兒所介紹的一種原位雜交的方法是通過后者,以標記探針,然后用酶聯(lián)的方法進行檢測。

在原位雜交過程中,需要使用標記的核酸探針,通常是在性核素或非性物質(zhì)中標記的。這些探針可以通過不同的方式制備,例如從已知序列的DNA或RNA制備,或者通過使用生物信息學方法設計和合成新的探針。

在進行原位雜交時,細胞或組織需要固定在適當?shù)闹С治锷希巛d玻片。然后,探針與細胞或組織中的DNA或RNA進行雜交,通常是在加熱條件下進行的。接下來,通過洗滌和顯影步驟去除未結(jié)合的探針和信號增強劑,后用顯微鏡觀察雜交信號的位置。

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