DNA 探針為原位雜交提供較高的靈敏度。與RNA探針相比,DNA探針與靶mRNA 分子的雜交強(qiáng)度較弱,因此在雜交后的洗滌中不應(yīng)使用甲醛。
探針特異性至關(guān)重要。如果已知細(xì)胞中mRNA或DNA的確切核苷酸序列,則可據(jù)此設(shè)計(jì)高度的互補(bǔ)探針。如果超過 5% 的堿基對不互補(bǔ),動物組織原位雜交,那么探針只能與靶序列發(fā)生輕度雜交。這意味著,探針更容易在洗滌和檢測步驟中被洗去,可能無法正確檢測。
原位雜交是一種強(qiáng)大的技術(shù),它使研究人員能夠在細(xì)胞或組織中確定特定DNA或RNA序列的位置。這項(xiàng)技術(shù)在基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用中都有廣泛的應(yīng)用。通過了解原位雜交的基本原理和實(shí)驗(yàn)步驟,研究人員可以更好地理解其功能并應(yīng)用于他們的研究中。原位雜交技術(shù)的定義和基本原理原位雜交技術(shù)是一種基于核酸分子雜交原理,將標(biāo)記的核酸探針與生物組織或細(xì)胞中的DNA或RNA進(jìn)行特異性結(jié)合,從而在細(xì)胞水平上檢測目標(biāo)核酸序列分布的技術(shù)。原位雜交技術(shù)的基本原理是利用DNA或RNA的互補(bǔ)性,通過加熱或化學(xué)反應(yīng)使探針與組織或細(xì)胞中的目標(biāo)核酸序列形成雙鏈復(fù)合物,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)核酸序列的定位。
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