原位雜交技術(shù)可以應(yīng)用于以下場景:
組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位。例如,可以用于檢測EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細(xì)胞病毒DNA等。
癌基因、抑癌基因及其他各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測。
檢測染色體的變化,如染色體數(shù)量異常和染色體易位等。
在植物基因組研究中的應(yīng)用。例如,通過與特定基因序列的探針進(jìn)行雜交,可以在植物染色體上定位到目標(biāo)基因的位置,進(jìn)而構(gòu)建遺傳圖譜,為植物育種和基因組研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
把濾膜放在紙巾上于室溫晾干后,把濾膜(編號面朝上)放在一張保鮮膜上,并在保鮮膜上作幾個(gè)不對稱的標(biāo)記,以使濾膜與性自顯影片位置對應(yīng)。
用第二張保鮮膜蓋住濾膜。加光片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小時(shí)。
底片顯影后,在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標(biāo)記陽性雜交信號的位置,同時(shí)在不對稱分布點(diǎn)的位置上作出標(biāo)記。可從底片上取下透明紙,通過對比紙上的點(diǎn)與瓊脂上的點(diǎn)來鑒定陽性菌落。
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