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生物醫(yī)學樣品在做透射電鏡觀察時,基本上都是將原始樣品以環(huán)氧樹脂包埋,然后用非常精密的超薄切片機切成薄片,刀具為的玻璃刀或者是鉆石刀。切下的生物醫(yī)學樣品的厚度通常只有幾十個納米(nm),這在一般情況下用肉眼是不能直接看到的,必須讓切片飄浮在水面上,由操作熟練的技術(shù)人員借助特殊的照明光線,并以特殊的角 度才能觀察到如此薄的切片。切好的薄片被撈放在銅網(wǎng)上,經(jīng)過染色和干燥后才能用于觀察.透射電鏡樣品的制作是一個漫長、復雜而又精密的過程,技術(shù)性非常強。但是我們前面介紹過,要想獲得優(yōu)良的電鏡影像,制做優(yōu)良的樣品標本乃是非常重要的步。

透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,簡稱TEM),可以看到在光學顯微鏡下無法看清的小于0.2um的細微結(jié)構(gòu),這些結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)或超微結(jié)構(gòu)。要想看清這些結(jié)構(gòu),就必須選擇波長更短的光源,以提高顯微鏡的分辨率。1932年Ruska發(fā)明了以電子束為光源的透射電子顯微鏡,電子束的波長要比可見光和紫外光短得多,并且電子束的波長與發(fā)射電子束的電壓平方根成反比,也就是說電壓越高波長越短。TEM的分辨力可達0.2nm。

現(xiàn)在我們發(fā)現(xiàn)束流的設置應該是隨著放大倍數(shù)而變換的,對于TESCAN用戶來說,比較方便,可以直接從軟件中讀取當前電鏡調(diào)節(jié)對應的束流,結(jié)合視野寬度很容易知道單點像素的大小,從而快速找到束斑與像素匹配的工作條件。既保證了沒有信息丟失,又保證了的束流強度和信噪比。

此外對于EBSD分析也一樣,EBSD分析為了追求速度,需要較大束流,植物重金屬電鏡測試服務,而束流增大會增大束斑,導致花樣重疊無法標定。而TESCAN用戶則可以輕易的根據(jù)EBSD的步長來設置束斑大小,確保在不會出現(xiàn)花樣重疊的情況下束斑達到,采集速度快。

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