外泌體電鏡檢測(cè):外泌體是細(xì)胞外囊泡的一種,其膜來(lái)源與粒徑范圍與細(xì)胞外囊泡相似,胞外囊泡粒徑及濃度服務(wù),電鏡下,顯示出典型的茶托狀超微結(jié)構(gòu)。
透射電鏡作為鑒定外泌體的金標(biāo)準(zhǔn),一直是科銳諾生物主營(yíng)的業(yè)務(wù)之一。透射電鏡點(diǎn)分辨率可以達(dá)到0.1nm,非常適合用來(lái)觀察外泌體類囊泡??蛻糁恍枰乃托迈r或者凍存的外泌體樣品,我們負(fù)責(zé)從制片到觀察的全套檢測(cè)服務(wù)。經(jīng)過(guò)多年實(shí)操與研發(fā)經(jīng)驗(yàn),科銳諾已經(jīng)熟練掌握外泌體電鏡檢測(cè)。做過(guò)的樣品來(lái)源包括:常規(guī)細(xì)胞上清、外周血、尿液、腦脊液、肺泡灌洗液、組織提取液、乳液、汗液等來(lái)源的外泌體。分離方法包括:PEG沉淀法、蔗糖密度梯度離心法、差速超1速離心法、色譜柱法、親合法、超濾法、切向流、微流控等。對(duì)于不同來(lái)源,不同方法的樣品,實(shí)驗(yàn)前,會(huì)進(jìn)行詳細(xì)溝通及結(jié)果預(yù)估。結(jié)合NTA數(shù)據(jù),電鏡效果非常可靠且可控。 測(cè)試周期為3-7個(gè)工作日。
外泌體作為活1細(xì)胞分泌的含有RNA 和蛋白質(zhì)的微囊泡,直徑為 30-150nm之間,廣泛分布于外周血、尿液、唾液、腹1水、羊水等多種體液中。研究表明,外泌體包含多種活性分子,如蛋白質(zhì)、脂肪和核酸(mRNA、miRNA 及其它非編碼RNA ) 等, 能作為信號(hào)分子傳遞給靶1細(xì)胞,介導(dǎo)細(xì)胞間的物質(zhì)傳遞與信息交流,文獻(xiàn)報(bào)道體液中外泌體 RNA (特別是miRNA 等非編碼RNA)在不同的疾病模型中存在明顯的表達(dá)差異。同時(shí),這些分子被外泌體的脂膜所包裹和保護(hù), 能保持其原有穩(wěn)定性和生物學(xué)功能, 已經(jīng)成為液體活檢的重要分子標(biāo)志物。近年來(lái), 外泌體已成為科研熱點(diǎn),其在臨床上巨大的應(yīng)用價(jià)值, 引起了眾多研究者以及商業(yè)人士的濃厚興趣。隨著相關(guān)技術(shù)的發(fā)展, 有關(guān)外泌體在臨床疾?。ㄓ绕涫悄[1瘤)的早期診斷、治1療、預(yù)后及伴隨診斷的應(yīng)用研究正在蓬勃開(kāi)展。通過(guò)高通量技術(shù)對(duì)外泌體 RNA進(jìn)行測(cè)序, 可快速高1效獲得外泌體RNA 的全1面信息,是疾病診斷和隨訪的理想手段。透射電鏡作為鑒定外泌體的金標(biāo)準(zhǔn),一直是科銳諾生物主營(yíng)的業(yè)務(wù)之一。透射電鏡點(diǎn)分辨率可以達(dá)到0.1nm,非常適合用來(lái)觀察外泌體類囊泡??蛻糁恍枰乃托迈r或者凍存的外泌體樣品,我們負(fù)責(zé)從制片到觀察的全套檢測(cè)服務(wù)。一個(gè)樣品提供2個(gè)放大倍數(shù),10-15張照片。檢測(cè)周期為7個(gè)工作日。
在透射電鏡基礎(chǔ)上,用外泌體標(biāo)記蛋白對(duì)外泌體進(jìn)行免1疫標(biāo)記,利用膠體金標(biāo)記出外泌體表面的特定抗原的位置。結(jié)合透射電鏡形態(tài)學(xué)定性的特點(diǎn),同時(shí)確定外泌體標(biāo)記蛋白的位置。這樣同時(shí)從形態(tài)學(xué)及免1疫學(xué)原理上驗(yàn)證外泌體。這樣數(shù)據(jù)結(jié)果中既可以獲得經(jīng)典形態(tài)的外泌體,又可以定性及定位外泌體表面的標(biāo)志蛋白。這樣具有更充分的說(shuō)服力。
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