熒光原位雜交(FISH)技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn):
可多重染色:利用不同的熒光染料標(biāo)記不同的探針,可以實(shí)現(xiàn)多重?zé)晒庠浑s交,從而同時(shí)檢測(cè)多個(gè)序列,提高實(shí)驗(yàn)效率了。
高度創(chuàng)新性和性:FISH技術(shù)不僅可以用于研究已知基因或序列的染色體定位,還可以用于未基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究,植物組織原位雜交,在基因定性、定量、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢(shì)。
植物原位雜交在遺傳育種方面的應(yīng)用主要包括:
異源染色質(zhì)及多種染色體畸變檢測(cè):通過遠(yuǎn)緣雜交把有用遺傳物質(zhì)基因的異源染色質(zhì)漸滲到植物中。如帶有幾種抗病基因的黑麥1R染色體已被整合到許多高產(chǎn)的小麥品種中。原位雜交技術(shù)則是鑒定外源染色體(質(zhì))的有效手段。
基因組印記研究:基因組印記是指一個(gè)基因的兩條染色體上的DNA序列存在差異。通過植物原位雜交技術(shù),可以檢測(cè)到基因組印記的存在和分布,從而幫助確定基因組的進(jìn)化、遺傳和功能特征。
怎樣保證原位雜交實(shí)驗(yàn)操作時(shí)的溫度?
建議儀器操作,人工操作的話要注意:
(1)對(duì)熒光原位雜交操作過程中可能使用的一些儀器進(jìn)行溫控檢查,不符合要求的進(jìn)行更換。
(2)盡可能地保持環(huán)境溫度在20度以上。
(3)針對(duì)需要預(yù)熱以達(dá)到要求溫度的試劑,在使用前必須使用溫度計(jì)對(duì)其進(jìn)行測(cè)溫。
(4)同時(shí)檢測(cè)的樣本不超過4塊,操作一定要迅速,實(shí)驗(yàn)人員要注意一些小部件的溫度,尤其是在冬季。
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