熒光原位雜交-湖北原位雜交-貝科新肽

詢盤留言 |投訴|申領|刪除 產(chǎn)品編號：585932839 更新時間：2024-10-12

武漢貝科新肽科技有限公司

主營業(yè)務：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
公司官網(wǎng)：bkxtbio.com.cn
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號

業(yè)務熱線： 15002786799 (夏先生先生)

產(chǎn)品詳情
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價格說明 : 議定
包裝說明 : 不限
物流說明 : 貨運及物流
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原位雜交第三天

1）用1ml含10％熱滅清的MABT溶液置換溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時以上，后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。

2）用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，熒光原位雜交，每次放置五分鐘。

3）將胚胎轉入十六孔板中，湖北原位雜交，吸去staining buffer，加上300ul BM Purple AP Substrate(底物，用之前加5mM左旋米唑)，十六孔板外面包上錫箔紙以避光，避免搖動，室溫下顯色。

4）每隔一小時觀察胚胎是否開始顯色

5）將顯色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加上4％多聚甲醛固定，拍照。

6）4C冰箱保存。

原位雜交（In situ hybridazation）

固定

收集斑馬魚的胚胎，在Holfretor水中培養(yǎng)，到達所需要的發(fā)育時期時，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，在4℃保存，二十四小時后用50%2%多聚甲醛溶液洗，然后換成，在-20C 保存，待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用處理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養(yǎng)，可阻斷色素的形成)

原位雜交技術(In situ hybridization，ISH)是分子生物學、組織化學及細胞學相結合而產(chǎn)生的一門新興技術，植物原位雜交，始于20世紀60年代。1969年美國耶魯大學的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖體基因探針與其卵母細胞雜交，將該基因進行定位，與此同時Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相繼利用同位素標記核酸探針進行了細胞或組織的基因定位，從而創(chuàng)造了原位雜交技術。自此以后，由于分子生物學技術的迅猛發(fā)展，特別是20世紀70年代末到80年代初，分子、質粒和噬菌體DNA的構建成功，為原位雜交技術的發(fā)展奠定了深厚的技術基礎。

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