將32 P標記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘,迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過夜。雜交期間,盛濾膜的容器應蓋嚴,以防液體蒸發(fā)。
雜交結束后,去除雜交液,立即于室溫把濾膜放入大體積(300-500ml)的2×SSC和0.1% SDS溶液中,輕輕振搖5分鐘,并將濾膜至少翻轉一次。重復洗 一次,同時應避免膜干涸。
68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次,每次1-1.5小時。此時已可進行自顯影。如背景很高或?qū)嶒炓髧栏竦南茨l件,原位雜交,可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。
原位雜交技術在許多領域都有應用,以下是其中幾個具體應用:
細胞生物學和發(fā)育生物學:在細胞生物學和發(fā)育生物學領域,原位雜交技術常被用于研究基因的表達和定位。例如,通過標記特定基因的探針,熒光原位雜交,可以在細胞或組織中檢測特定基因序列的存在和分布,進而了解基因在細胞分化、發(fā)育和功能中的作用。
基因組學和遺傳學研究:原位雜交技術也可用于基因組學和遺傳學研究。例如,原位雜交公司,通過標記多個基因探針,可以檢測基因組中的多個基因序列,從而進行基因定位、基因表達譜分析、基因突變檢測等研究。
病毒學和病原微生物研究:在病毒學和病原微生物學領域,原位雜交技術服務,原位雜交技術常被用于檢測和定位病毒、細菌等病原微生物。例如,通過標記特異性或核酸探針,可以檢測組織中病原微生物的存在、情況以及分布特征,從而為疾病的預防、診斷和提供依據(jù)。
總之,原位雜交技術在生物學、醫(yī)學、基因組學、遺傳學、病毒學和病原微生物學等領域都有廣泛的應用價值,為人類認識生命現(xiàn)象、探究疾病機制和提供了有力的技術支持。
原位雜交是一項非常重要的生物技術,可以用于研究基因表達和調(diào)控,檢測基因變異和染色體異常,監(jiān)測細胞生長和凋亡,以及識別特定的細胞類型或組織。然而,它需要特殊的操作技術和設備,以及嚴格的對照實驗才能獲得可靠的結果。原位雜交是一項非常重要的生物技術,可以用于研究基因表達和調(diào)控,檢測基因變異和染色體異常,監(jiān)測細胞生長和凋亡,以及識別特定的細胞類型或組織。然而,它需要特殊的操作技術和設備,以及嚴格的對照實驗才能獲得可靠的結果。
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