生物領域應用原位雜交技術的例子:
物種進化與系統(tǒng)發(fā)生學研究:在物種進化與系統(tǒng)發(fā)生學研究中,原位雜交技術可以用于檢測物種之間的親緣關系和進化歷程。例如,可以比較不同物種之間特定基因序列的差異,進而研究它們的親緣關系和進化歷程。
原位雜交技術在基因表達和調控、細胞分化與發(fā)育、研究和物種進化與系統(tǒng)發(fā)生學等領域都有廣泛的應用價值,植物原位雜交,為深入探究生命現象、促進生物技術的發(fā)展提供了有力的技術支持。
組織原位雜交(Tissue in situ hybridization),即原位雜交組織化學技術和原位雜交細胞化學技術
原位雜交技術的基本原理
利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,湖北原位雜交,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現穩(wěn)定的雙鏈區(qū),形成雜交的雙鏈。
1.兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,通過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA一RNA或RNA一RNA雙鍵分子
2.應用帶有標記的(有性同位素,如3H、35S、32P,熒光素、生物素、等非性物質)DNA或RNA片段作為核酸探針,與組織切片或細胞內待測核酸(RNA或DNA)片段進行雜交
3.用自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的mRNA或DNA的存在與定位
用原位雜交術,可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。
此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水來探討細胞的功能表達及其調節(jié)機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。
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