熒光原位雜交(FISH)技術(shù)具有以下優(yōu)點:
可多重染色:利用不同的熒光染料標記不同的探針,可以實現(xiàn)多重熒光原位雜交,從而同時檢測多個序列,提高實驗效率了。
高度創(chuàng)新性和性:FISH技術(shù)不僅可以用于研究已知基因或序列的染色體定位,還可以用于未基因或遺傳標記及染色體畸變的研究,在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優(yōu)勢。
原位雜交第三天
1) 用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液,放置搖床上25分鐘,然后用1mlMABT置換,25分鐘,再用1mlMABT溶液置換,一小時以上,后用1mlMABT溶液置換,25分鐘。
2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分鐘。
3)將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),染色體原位雜交,十六孔板外面包上錫箔紙以避光,避免搖動,室溫下顯色。
4)每隔一小時觀察胚胎是否開始顯色
5)將顯色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。
6)4C冰箱保存。
植物組織原位雜交技術(shù)在植物基因表達和調(diào)控研究中具有廣泛的應(yīng)用。它可以用來研究植物發(fā)育、生長、逆境響應(yīng)等方面的基因表達模式和調(diào)控機制。例如,可以利用該技術(shù)研究植物中的轉(zhuǎn)錄因子、信號轉(zhuǎn)導通路、代謝途徑等基因的表達和調(diào)控。此外,植物組織原位雜交技術(shù)還可以用來鑒定植物中的病原體、檢測植物等方面。
總之植物組織原位雜交技術(shù)是一種重要的分子生物學技術(shù),可以用來研究植物基因的表達和調(diào)控。它具有操作簡便、結(jié)果可靠、應(yīng)用廣泛等優(yōu)點,是植物分子生物學研究中不可或缺的工具。
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